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断肠草提取物对小鼠的急性毒杀研究

栏目:灭老鼠       发表时间:01-01       人气:0

断肠草提取物对小鼠的急性毒杀研究

  【摘要】

  目标探讨断肠草提取物对小鼠的毒力作用.

  方法灌胃法.

  结果断肠草提取物对小鼠存在很强的鸩杀作用.一次性注射0.5m

  L、浓度为0.003、0.004、0.005g/ml的断肠草提取物时,小鼠在30min内的逝世亡率分辨为8.33%、41.67%、100%.同时,断肠草提取物对小鼠的鸩杀作用敏捷.当浓度为0.005g/ml时,小鼠在20min内全部逝世亡,均匀致逝世时光为12.8min;浓度为0.004g/ml时,试鼠在28min内逝世亡了5只,残余的2d内未见逝世亡;浓度为0.003g/m,l试鼠在16min时逝世亡1只,残余的2d内仍未见逝世亡.中毒小鼠均表示出活动缓慢,步调不稳,身材抽搐,肤色变黑等一些症状.

  论断断肠草提取物对小鼠鸩杀作用明显,所需剂量少,致逝世时光短,为开动员物性灭鼠剂供给了技巧参考.

  鼠类不仅品种多、个体数量多,而且成长发育快,存在强盛的滋生力、散布广、迫害重大等.目前防治鼠害的方法重要有化学灭鼠、生物灭鼠、人工机械灭鼠等.长期以来利用最多、最广的为化学灭鼠.但化学灭鼠会使害鼠易产生耐药性跟拒食性,导致防效降落,且造成环境沾染,产生二次中毒[1].断肠草(GelesemiumelegansBenth)属马钱科(Logani-

  aceae)胡蔓藤属(Gelesemium),俗名大茶药、胡蔓藤等,为多年生常绿藤本动物.断肠草在医药、畜牧业跟农业方面都有开发跟利用[2-3],尤其在医药方面开发利用的很多,研究表明断肠草有抗肿瘤、免疫调节、镇痛、医治皮肤病、扩瞳等作用.断肠草含多种钩吻碱,有剧毒,民间常用作杀虫剂,故亦名"菜虫

  药".骆悦等[4]发明,断肠草甲醇粗提物及断肠草

  生物碱对福寿螺幼螺跟成螺有良好的把持作用.然

  而断肠草对害鼠的研究鲜见报道,本文抉择断肠草

  提取物,研究对小鼠的毒力作用,为进一步研制动物

  性杀鼠剂供给技巧参考.

  1资料与方法

  1.1小鼠实验于2010年3~4月在广东省惠州南生成物科技有限公司进行.实验小鼠取自该公司养殖的昆明种小鼠,滋生多代,选取体重18~22g的健康小鼠做为实验对象.

  1.2断肠草乙醇提取物(膏状)由惠州南生成物科技有限公司经索氏抽提提取并供给.

  1.3试剂75%乙醇,蒸馏水等,市售.

  1.4仪器电子天平、注射器、棕色小瓶、量筒、烧

  杯、玻璃棒.

  1.5方法采取灌胃法[5],操作步骤如下:以左手捉持小鼠,使腹部朝上,颈部拉直.右手持灌胃管(由1~2ml注射器上连接磨去针尖的针头制成).灌胃管长约4~5cm,直径约1mm,先从小鼠口角插进口腔内,而后用灌胃管压其头部,使口腔与食道成始终线.再将灌胃管从舌面紧沿上腭进入食道,灌胃管插入约1/2处将药液注入.若遇阻力,应退出灌胃管再插入,留神操作时动作要轻.

  1.6断肠草提取物毒性实验

  1.

  6.1断肠草提取物药液的配制用电子天秤称取断肠草提取物1g,用10ml的20%乙醇溶解,搅拌均匀,配制成浓度为0.1g/ml的断肠草提取物母液,盛于棕色小瓶中,放入4%冰箱保存.利用时以10倍梯度浓度稀释母液,分辨配制成0.1、0.01跟0.001g/ml3个浓度药液.

  1.

  6.2断肠草提取物毒性料想定将小鼠按A(0.1g/ml)、B

  (0.01g/ml)、C

  (0.001g/ml)分为3组,每组4只小鼠,禁食12h后用灌胃法对小鼠一次性注射0.5m,l而后畸形豢养,察看小鼠的反应,记录小鼠逝世亡时光及逝世亡数量.每个组重复3次.

  1.

  6.3断肠草提取物毒性测定随机选取48只小鼠,按A

  (0.005g/ml)、B

  (0.004g/ml)、C

  (0.003g/ml)、D

  (0.002g/ml)分为4组,每组4只试鼠,重复3次,实验方法同

  1.

  4.2.

  1.

  6.4小鼠中毒反应察看灌胃后5d内察看记录各组小鼠在注射后的反应及中毒症状.

  2结果与剖析

  2.1鸩杀预实验测定灌胃0.5ml断肠草提取物对小鼠的鸩杀料想定结果见表1.0.1g/ml断肠草提取物处理后,小鼠在12min内全部逝世亡,均匀致逝世时光为7.4min;注射灌胃断肠草提取物0.01g/m,l小鼠在21min内全部逝世亡,均匀致逝世时光为13.3min;而灌胃断肠草提取物0.001g/ml时,在2d内未见小鼠逝世亡.同时还可看出,当提取物浓度在0.01g/ml以上时,随着浓度的增加小鼠逝世亡时光缩短.由此表明,断肠草提取物在浓度达0.01g/ml以上时对小鼠有较强的鸩杀作用.故毒性实验中采取0.01~0.001g/ml浓度进行测定.

  2.2毒性实验结果灌胃0.5ml断肠草提取物对小鼠的毒性实验结果(表2).当灌胃浓度为0.005g/ml时,试鼠在20min内就全部逝世亡,均匀致逝世时光为12.8min;当灌胃浓度为0.004g/ml时,试鼠在28min内逝世亡了5只,残余的2d内未见逝世亡;当灌胃浓度为0.003,试鼠在16min时逝世亡1只,残余的2d内未见逝世亡;灌胃浓度为0.002g/ml时,2d内均未见小鼠逝世亡.

  从表2中可看出,小鼠的逝世亡率随着浓度的降落而降落,逝世亡时光也向后推迟.灌胃浓度在0.005g/ml以上,小鼠在20min内全部逝世亡.灌胃浓度为0.003g/ml以上时,28min内小鼠逝世亡率为41.67%.灌胃浓度达0.003g/ml时,小鼠的逝世亡率很低,仅为8.33%,表明对小鼠有明显鸩杀作用的浓度为0.003~0.005g/m,l且在这可致逝世浓度范畴内,随着作用剂量的增加,小鼠的致逝世时光缩短.

  2.3小鼠中毒症状察看灌胃后,最初小鼠无异样;5min左右,小鼠活动缓慢,步调不稳,蜷缩着,头部开端抽动,缓缓地小鼠全身颤抖;再过一段时光后,小鼠开端活泼跳动,在鼠笼内到处窜跳,颤抖更加厉害;濒临逝世亡时,小鼠连续挣扎,前腿不动蹬后腿,1min左右抽搐不止直至逝世亡.同时,小鼠在挣扎进程中,身材肤色由原来的粉红色逐步变黑,眼睛外突.此外,察看还发明,有些小鼠在后期会呈现磨牙景象.

  3论断

  研究结果表明,断肠草提取物对小鼠鸩杀作用明显,存在急性致逝世的后果.在可致逝世浓度范畴内,随着灌胃浓度的增加,小鼠的致逝世时光减少,个别致逝世时光约30min.当断肠草提取物浓度在0.005g/ml以上时,20min内小鼠全部逝世亡.同时灌胃后小鼠存在一个短暂的埋伏期,约5min左右.之后,小鼠则开端表示出一些全身颤抖、抽搐等症状,直至逝世亡.据研究报道,断肠草植株中含有的活性成分叫钩吻碱,属于吲哚类碱,植株各局部生物碱的含量以根皮部(1.5%~2.2%)为最高,茎皮(1%~1.1%)次之,茎含量为0.4%~0.5%,叶含量仅0.3%[3].这为下一步分别跟提纯杀鼠活性成分,为断肠草作为动物源灭鼠剂的开发供给了依据.

  在实际防控工作中,因为化学药物一直呈现抗性、公害等问题,人们越来越偏向于从天然物质中寻找更保险、更有效的活性物质,以开发新型的动物源农药.动物性农药来源于天然,有其顺畅的降解途径,无残毒遗留,不沾染环境,不易产生抗药性,因此受到普遍关注.韩崇选等[6]对多种动物进行了杀鼠活性的测定,发明曼陀罗、苦参、铁棒锤等动物对试鼠存在较强的鸩杀活性,且无二次中毒景象产生.詹绍琛等[7]用闹羊花进行灭鼠实验,表明闹羊花叶煎剂灌服或毒饵试鼠都有较强的毒性.张美文等[8]将烟草水煮液与玉米粉、面粉饵料按一定的比例制成的毒饵豢养小鼠,表明烟草对鼠类也存在较好的鸩杀作用.我国动物质源极为丰富,对动物源农药的研究历史久长,有丰富的教训跟深沉的基本.因此,研究与开发保险性高的动物性灭鼠剂,将成为现今新型灭鼠剂研制的热点,对解决当前化学灭鼠剂所引起的社会跟环境问题存在重要的意思.

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